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高效液相色譜系統(tǒng)有哪些重要結(jié)構(gòu)是我們必須要了解的?

更新時(shí)間:2021-05-26|  點(diǎn)擊次數(shù):1416
       現(xiàn)今,高效液相色譜系統(tǒng)的應(yīng)用遠(yuǎn)遠(yuǎn)廣于氣相色譜法。它廣泛用于合成化學(xué)、石油化學(xué)、生命科學(xué)、臨床化學(xué)、藥物研究、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢驗(yàn)及法學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域。
  高效液相色譜系統(tǒng)的重要結(jié)構(gòu)組成:
  (1)高壓泵
  HPLC的發(fā)展帶動(dòng)了泵系統(tǒng)的發(fā)展。泵是高效液相色譜系統(tǒng)中較重要的組成部分,主要是將流動(dòng)相從溶劑貯存器送入液相系統(tǒng)中,并在高壓下保持流量和壓力的穩(wěn)定。目前LC系統(tǒng)中使用的大多數(shù)泵都是通過(guò)電動(dòng)活塞的往復(fù)運(yùn)動(dòng)來(lái)產(chǎn)生流量的(往復(fù)泵)。由于活塞的運(yùn)動(dòng)可以產(chǎn)生“脈沖”。
  (2)進(jìn)樣器
  進(jìn)樣器位于泵的旁邊。較簡(jiǎn)單的方法是使用注射器將樣品注入液相系統(tǒng)?,F(xiàn)在一般都使用六通進(jìn)樣閥和自動(dòng)進(jìn)樣器。其中,自動(dòng)進(jìn)樣器可以在設(shè)定的時(shí)間內(nèi)重復(fù)進(jìn)樣。
 ?。?)色譜柱
  色譜柱主要是用來(lái)分離混合物中各組分。目前常用的是不銹鋼外殼的柱子,而不是玻璃柱。通常使用的填料是二氧化硅或聚合物凝膠。用于液相色譜LC的洗脫液有酸性或堿性的,由于不銹鋼對(duì)多種溶劑具有耐受性,因此大多數(shù)柱殼由不銹鋼制成。
 ?。?)檢測(cè)器
  檢測(cè)器是將色譜柱分離出來(lái)的各組分檢測(cè)出來(lái)。當(dāng)待測(cè)物不存在時(shí),洗脫液的成分是一致的,而加入待測(cè)物可以改變洗脫液的組成,檢測(cè)器就可以測(cè)量這種差異,并轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳遞給記錄儀。檢測(cè)器有多種,如紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器等等。
 ?。?)數(shù)據(jù)記錄儀
  檢測(cè)器檢測(cè)到的洗脫液的變化是以電信號(hào)的形式呈現(xiàn)的,因此我們的眼睛是看不到,需要借助計(jì)算機(jī)的數(shù)據(jù)處理器(積分器)。數(shù)據(jù)處理器有多種類(lèi)型,如一個(gè)簡(jiǎn)單的由內(nèi)置打印機(jī)和文字處理器組成的系統(tǒng),或帶有專(zhuān)門(mén)為L(zhǎng)C系統(tǒng)設(shè)計(jì)的軟件系統(tǒng),這種系統(tǒng)不僅具有數(shù)據(jù)采集功能,還具有峰值擬合、基線(xiàn)校正、自動(dòng)濃度計(jì)算、分子量測(cè)定等功能。
 ?。?)脫氣機(jī)
  HPLC系統(tǒng)中可能存在一些肉眼看不見(jiàn)的氣體,會(huì)導(dǎo)致噪音增大,基線(xiàn)不穩(wěn)定等現(xiàn)象。脫氣機(jī)使用特殊的聚合物膜管來(lái)去除氣體,聚合物膜管表面的很多非常小的孔允許空氣通過(guò),同時(shí)可以阻止任何液體通過(guò)。
 ?。?)柱溫箱
  液相色譜分離通常受柱溫的影響很大。為了獲得一致的結(jié)果,保持溫度一致是很重要的。對(duì)于某些分析,例如糖和有機(jī)酸,在50~80°C下可以獲得更好的結(jié)果。因此,色譜柱通常放在柱形加熱器中。
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